PCR analyse: hva er det? Slik tar du PCR-testen riktig

Ikke så lenge siden, en pålitelig,en svært sensitiv og rask metode for å diagnostisere ulike smittsomme sykdommer hos en person. Denne metoden kalles "PCR-analyse". Hva er det, hva vil dets essens, hvilke mikroorganismer det kan avsløre og hvordan du skal overlevere det, vil vi fortelle i vår artikkel.

Oppdagelseshistorie

Oppfunnet metoden for polymerasekjedereaksjon (PCR)Amerikanske forsker Cary Myullis i 1983. I utgangspunktet patenterte metoden for diagnose av selskapet "Cetus Corporation", hvor hans skaperen jobbet. Men i 1992 ble alle rettigheter og patenter solgt til firmaet "Hoffman-La Roche". Etter det viste det seg at parallelle lignende studier ble utført og registrert av andre amerikanske biologer, som Alice Chen, David Edgar, John Treel. I 1980 behandlet sovjetiske forskere A. Slyusarenko, A. Kaledin og S. Gorodetsky dette problemet. Derfor var det umulig å bestemme den eneste rettighetshaveren. Mange fremragende biokjemister har bidratt til utviklingen av polymerasekjedereaksjonsmetoden og patentert deres innovasjoner. For øyeblikket utføres PCR-analyse overalt i spesialutviklede laboratorier.

Kjernen i PCR-diagnostikkmetoden

PCR analyse: hva er det og hvordan fungerer det? Kjernen i metoden er å øke i et bestemt mikrobielt medium ved hjelp av et spesielt enzym av DNA-polymerase under kunstige forhold. For å gjøre dette, multipliserer det eksisterende DNA-materialet. Således, i nærvær av en patogen mikroorganisme i prøven, vil mengden økes gjennom biokjemiske laboratoriemanipulasjoner, og bakterien kan ikke detekteres i et mikroskop.

PCR analyse - hva er det?

Hvordan foregår materialforskningen?

Analysen krever:

  • DNA-templaten;
  • primere som forbinder endene av et fragment av materiale;
  • et termisk stabilt DNA-polymeraseenzym;
  • kjemiske stoffer som sikrer at enzymer fungerer riktig
  • en bufferløsning som er nødvendig for å skape passende forhold for vekst og utvikling av DNA-materiale.

    PCR-analyse 12

For å utføre PCR utføres 25-30 repetisjoner, bestående av tre trinn: denaturering, glødning og forlengelse.

For analyse av polymerasekjedereaksjonbruk en spesiell enhet - en forsterker. Moderne utstyr lar deg sette det nødvendige programmet for oppvarming og kjøling av rørene for å eliminere feil under diagnosen.

Hvor brukes diagnosen?

Metoden for polymerasekjedereaksjonen anvendes i forskjellige fagområder:

  • Forensiske forskere bruker det til å identifisere genetisk materiale, for eksempel hår, spytt eller blod;
  • PCR-blodanalyse hjelper med genotyping, for eksempel å oppdage en individuell genetisk utviklet reaksjon på et bestemt legemiddel;
  • ved hjelp av en slik metode etablere eksistensen av familiebinder mellom mennesker;
  • Den mest populære PCR-metoden har blitt i medisinsk diagnostikk for definisjon av ulike smittsomme sykdommer.

Hvilke infeksjoner avslører PCR?

Så, medisin har lenge og med hell brukt analysen av PCR. Hva er det, vi har allerede lært. Og hvilke patogener kan detekteres med det? Følgende smittsomme sykdommer er diagnostisert av PCR:

  • hepatitt A, B, C;
  • ureaplasmosis;
  • candidiasis;
  • klamydia;
  • mycoplasmosis;
  • bakteriell vaginose;
  • smittsom mononukleose;
  • trichomoniasis;
  • papillomavirusinfeksjon;
  • tuberkulose;
  • herpesinfeksjon av 1 og 2 nd typer;
  • Helicobacter pylori-infeksjon;
  • cytomegalovirus;
  • difteri;
  • salmonellose;
  • HIV-infeksjon.

    PCR-analyse for HIV

Også PCR-metoder brukes i diagnosen kreft.

Fordelene ved fremgangs

Diagnose PCR har flere fordeler:

  1. Høy følsomhet. Selv med bare noen få DNA-molekyler i mikroorganismen, bestemmer PCR-analysen forekomsten av infeksjon. Metoden vil hjelpe til med kroniske og latente sykdommer. Ofte i slike tilfeller er mikroorganismen uutviklet på andre måter.
  2. For studien er alt materiale, som spytt, blod, sex, hår, epitelceller, egnet. Den vanligste er en blodprøve og et urogenitalt smør på PCR.

    PCR: ta testen

  3. Det krever ikke langvarig avling av dyrking. Automatisert diagnostisk prosess lar deg få resultatene av studien etter 4-5 timer.
  4. Metoden er nesten 100% pålitelig. Bare enkelt tilfeller av falsk negativt resultat ble registrert.
  5. Evnen til å identifisere flere typerpatogener fra en enkelt prøve av materiale. Dette øker ikke bare prosessen med å diagnostisere sykdommen, men reduserer også materialkostnadene betydelig. Ofte foreskriver legen en omfattende PCR-analyse. Prisen på undersøkelsen, som består av definisjonen av seks patogener, er ca. 1500 rubler.

Anbefalinger for å forberede analysen

For at resultatene skal være pålitelige i PCR-studien, bør analysen gjøres etter anbefalingene for det foreløpige preparatet for diagnose:

  1. Før du gir opp spytt, bør du avstå fra å ta mat og medisinering 4 timer før du tar materialet. Umiddelbart før prosedyren, skyll munnen med kokt vann.
  2. Ovennevnte regler bør følges når du tar en prøve fra kinnets indre overflate. Etter skylling anbefales det at en lett hudmassasje utføres for å isolere sekretjonen av kjertelen.
  3. Urin er vanligvis høstet hjemme. For å gjøre dette må du gjennomføre et grundig toalett av kjønnsorganene. Det er nødvendig å samle 50-60 ml urin i en steril plastbeholder. For å sikre materialets renhet, anbefales det at kvinner setter inn en tampong i skjeden, og menn trekker maksimalt huden sammen. Du kan ikke ta materialet under menstruasjonsstrømmen.
  4. Til sædceller må du avstå fra seksualitetGjør i 3 dager før innsamling. Legene anbefaler også å nekte å besøke badstuen og ta et varmt bad, drikke alkohol og krydret mat. 3 timer før testen, må du avstå fra å urinere.
  5. For levering av urogenitalt smør, for eksempel hvisen analyse utføres på chlamydia PCR, både kvinner og menn anbefales seksuell hvile i 3 dager. 2 uker før testen, bør antibakterielle legemidler ikke tas. I en uke må du slutte å bruke intime geler, salver, vaginale suppositorier, sprøyting. 3 timer før testen, må du avstå fra å urinere. Under menstruasjonen utføres ikke samlingen av materiale, bare etter 3 dager etter at blodutløpet har sluttet, kan det ta et urogenitalt smør.

PCR under graviditet

I perioden av forventning til babyen mange smittsommeSeksuelt overførte sykdommer er ekstremt farlige for normal utvikling av fosteret. STDs kan provosere intrauterin vekstretthet, abort eller for tidlig fødsel, medfødte misdannelser av barnet. Derfor er det ekstremt viktig å sende en tidlig PCR-test. Det er nødvendig å sende inn analysen ved registrering - inntil 12 uker.

Analyse på Chlamydia PCR

Gjerde materiale stammer fra livmorhalskanalved hjelp av en spesiell børste. Prosedyren er smertefri og utgjør ikke fare for barnet. Vanligvis under graviditet analyseres klamydia ved PCR-metoden, samt ureaplasmose, mykoplasmose, cytomegalovirus, herpes og papillomavirus. Et slikt kompleks av undersøkelser kalles PCR-6.

PCR for HIV-diagnose

I forbindelse med det faktum at metoden for polymerasekjedereaksjonreaksjonen er svært følsom for endringer i kroppen og betingelsene for diagnosen, mange faktorer kan påvirke resultatet. Derfor er PCR-analyse for HIV-infeksjon ikke en pålitelig metode, dets effektivitet er 96-98%. I de resterende 2-4% av tilfellene gir testen falske positive resultater.

Men i noen situasjoner uten PCR-diagnostikk av HIVikke å klare. Vanligvis blir det administrert til personer med et falsk-negativt ELISA-resultat. Slike indikatorer indikerer at personen ennå ikke har utviklet antistoffer mot viruset, og de kan ikke detekteres uten en flere økning i nummeret. Dette kan oppnås ved å gjennomføre en blodprøve ved hjelp av en PCR-metode.

Også denne diagnosen er nødvendig for barn i det første år av livet som er født fra en HIV-positiv mor. Metoden er den eneste måten å pålitelig bestemme barnets status på.

PCR for diagnose av hepatitt

Polymerasekjedereaksjonsmetoden tillateroppdage DNA av hepatitt A, B, C-virus lenge før dannelsen av antistoffer mot infeksjon eller utseendet av symptomer på sykdommen. Spesielt effektiv er analysen av PCR for hepatitt C, da i 85% av tilfellene fortsetter en slik sykdom asymptomatisk, og uten rettidig behandling går det inn i et kronisk stadium.

PCR blodprøve

Tidlig påvisning av patogenet vil bidra til å unngå komplikasjoner og langvarig behandling.

Omfattende PCR-undersøkelse

Kompleks PCR analyse: hva er det? Denne prøvemetode polimezarnoy kjedereaksjon som omfatter å bestemme samtidig flere arter infeksjon: Mycoplasma genitalia, Mycoplasma hominis, Gardnerella vaginalis, Candida, trichomonas, cytomegalovirus, ureaplasma urealitikum, herpes første og andre typen, gonoré papillomavirus. Prisen på denne diagnosen varierer fra 2000 til 3500 rubler. avhengig av klinikken, materialer og utstyr, så vel som av typen av analyse: kvalitativ eller kvantitativ. Det som trengs i ditt tilfelle - legen bestemmer. I noen tilfeller, du bare rett og slett oppdage tilstedeværelsen av patogenet i andre, for eksempel HIV, den viktige rollen kvantitativ titer. referert til som "PCR-analyse av 12" i diagnostikk av alle de ovennevnte patogener undersøkelse.

Forklaring av analyseresultater

Dekoding av PCR-analysen er ikke vanskelig. Det er bare 2 skalaer av indikatoren - "positivt resultat" og "negativt resultat". Ved deteksjon av organismen kan leger med 99% konfidensintervall -te bekrefte tilstedeværelsen av sykdommen og for å begynne behandling av pasienten. Ved kvantitativ metode for bestemmelse av infeksjon i en tilsvarende kolonne indeks antall oppdaget bakterier vil bli spesifisert. Kun en lege kan bestemme graden av sykdommen og foreskrive den nødvendige behandlingen.

Hvor skal PCR analysen gå?

I noen tilfeller, for eksempel ved å bestemmeHIV-infeksjon ved PCR-metoden, med et negativt resultat, blir det nødvendig å gjennomføre ytterligere undersøkelser for å bekrefte resultatene.

Hvor skal analysen tas?

Hvor å sende inn PCR-analysen: i statens polykliniske eller i et privat laboratorium? Dessverre, i kommunale medisinske institusjoner, er utstyr og metoder ofte utdaterte. Derfor er det bedre å gi preferanse til private laboratorier med moderne utstyr og høyt kvalifisert personell. I tillegg vil du i en privat klinikk få resultater mye raskere.

I Moskva tilbyr mange private laboratoriergjennomføre PCR analyse på ulike infeksjoner. For eksempel, i klinikker som Vita, Complex Clinic, Happy Family og Uro-Pro, utføres PCR-analyse. Prisen på undersøkelsen er fra 200 rubler. for definisjonen av ett patogen.

Det kan konkluderes med at diagnosen smittsomPCR er i de fleste tilfeller en rask og pålitelig måte å oppdage patogenet i kroppen på tidlig stadium av infeksjon. Men i enkelte tilfeller er det verdt å velge andre metoder for diagnose. Behovet for å utføre en slik undersøkelse kan bare bestemmes av en spesialist. Dekoding av PCR-analysen krever også en profesjonell tilnærming. Følg legenes anbefalinger og ikke gi deg selv tester, som ikke er nødvendige.

likte:
0
Urinalysis av Nechiporenko. Slik monterer du det
Generell analyse av urin. Hvordan å ta og hva er normen?
Hvordan testes fekal okkult blod?
Hvor skal du ta kryss for analyse? Hva å gjøre når
Hvordan ta en avføringsprøve og om
Hvordan donere blod til hormoner riktig?
En blodprøve for HIV kan tas
Hvordan sender du urintest riktig?
Hva vil urinanalysen fortelle (dekoding)
Topp innlegg
opp